PRACTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA 3
PROPIEDADES DE LOS LIPIDOS
OBJETIVO: al termino de la práctica, el alumno estará capacitado para identificar las propiedades de los lípidos así mismo será capaz de diferenciar las grasas de los aceites.
INTRODUCCION: en bioquímica se acostumbra denominar lípidos a las sustancias que producen ácidos grasos por hidrólisis, así como a muchos otros compuestos biológicos solubles en grasas.
Las grasas y los aceites son usualmente mezclas de glicéridos mixtos, es decir, esteres del glicerol con diversos ácidos grasos.
Los ácidos grasos más abundantes en las plantas y los animales superiores tienen un numero par de átomos de carbono, tales como los ácidos saturados palmico (C16) y estarico, y los ácidos no saturados oleico y linoeico, ambos con 18 átomos de carbono.
Estos cuatro ácidos se encuentran en particular en la mantequilla, la manteca y el sebo.
Los lípidos constituyen la principal fuente de calorías; en la nutrición humana. Al oxidarse en el organismo producen bióxido de carbono, agua y calorías; su poder calorífico es mayor que el de los carbohidratos. Su absorción por las paredes intestinales es un fenómeno complejo. La corriente sanguínea los transporta después de los tejidos donde se queman para producir energía, o bien se almacenan.
Muchos investigadores piensan que las grasas saturadas tienden a elevar el contenido de colesterol en el organismo. Se cree que un contenido alto de colesterol en la sangre contribuye a endurecer las arterias y a provocar enfermedades cardiacas; por lo tanto, se procura sustituir las grasas saturadas por aceite de maíz y cártamo, que contienen principalmente ácidos oleicos y linoleico.
Los lípidos se descomponen por el calor y se vuelven rancios por oxidación; en este fenómeno los dobles enlaces se rompen, dando lugar a la formación de productos de olores desagradables. Para evitar esto se pueden hidrogenar los aceites, o agregarles antioxidantes. La medida de grado de instauración de u lípido se pueden efectuar en el laboratorio al determinar la cantidad de halógeno que puede adicionar.
MATERIAL: EQUIPO:
1 gradilla con 9 tubos de ensaye 1 baño María regulado a 100º C
5 pipetas graduadas de 5ML SUSTANCIAS:
1 perilla con cánula del no. 3 manteca de res
2 pinzas para tubo de ensaye alcohol etílico comercial
1 varilla de vidrio éter etílico
1 mechero bunsen o parrilla eléctrica. Cloroformo
Papel filtro
Manteca vegetal
Manteca de puerco
Mantequilla
Solución de sosa alcohólica
Yodo en cristales
Cloruro de mercurio II
Glicerina
TECNICA:
I. SOLUBILIDAD
1.- Coloque en una gradilla 5 tubos de ensaye medianos y numéralos del 1 al 5; pongan en cada tubo de ensaye una pequeña cantidad de manteca de res, añádele, respectivamente a cada tubo 5 ml de agua destilada, 5ml de etanol a temperatura ambiente, 5 ml de etanol caliente, 5 ml de éter y 5 ml de cloroformo y agítelos. Anote sus observaciones.
2.- Introduzca una varilla de vidrio en el tubo de ensaye que contiene la solución etérea y coloque una gota de dicha solución en un papel filtro. Deja que se evapore el éter. En el lugar donde puso la gota agregue 3 gotas de agua y deje secar el papel. Anote sus observaciones.
3.- En tubo de ensaye coloque una pequeña cantidad de manteca vegetal, añada 10 ml de agua destilada y caliente en baño María. Después añada 3 ml de solución de sosa alcohólica y caliente de nuevo. Anote y explique sus observaciones.
4.- Coloque en una gradilla 4 tubos de ensaye medianos y numérelos; en cada uno de ellos vierta 1 ml de glicerina y añádele respectivamente a cada tubo de 5 ml de los siguientes solventes: agua, éter, alcohol etílico y cloroformo. Anote sus observaciones.
5.- Introduzca una varilla de vidrio en el tubo que contiene la solución eteria y coloque unas gotas de dicha solución en un papel filtro; deje que se evapore el éter en lugar donde puso la solución etérea. Anote sus observaciones, agregue 3 gotas de agua y deje secar el papel; compárelas con la segunda prueba de este experimento y explique sus conclusiones.
II. PRUEBA PARA INSTAURACION DE LIPIDOS
6.- En una gradilla coloque 4 tubos de ensaye secos. En cada uno de ellos coloque respectivamente una pequeña cantidad de aceite de algodón común, manteca de puerco, manteca de res y mantequilla, y agréguele a cada tubo la cantidad mínima de de cloroformo para disolver la muestra. Añada a cada tubo, gota a gota y agitando, la solución de yodo hasta absorber de Hubl, hasta observar cambios.
Nota: Para preparar la solución de yodo de Hubl disuelva 1.3 grs de cristales de yodo en 25 ml de etanol comercial. Disuelva 1.5 grs de cloruro de mercurio II en 25 ml de etanol comercial. Mezcla las 2 soluciones y filtre si es necesario. Conserve la solución en frasco gotero ámbar.
OBSERVACIONES:
SOLUBILIDAD
TUBO 1.- La grasa queda en forma de plasta suspendida en el agua aunque algunas partículas queden pegadas en las paredes del tubo.
TUBO 2.- La grasa se queda en el tubo con un aspecto como miel de color amarillo pálido.
TUBO 3.- Se notan 2 faces en la manteca, la del fondo parece estar en su estado original mientras que la superior se ve cristalizada.
TUBO 4.- La manteca se mezcla totalmente con el éter y la mezcla se ve etérea, pero mantiene su color amarillo brillante.
TUBO 5.- Al igual que en el tubo anterior la manteca se diluyo por completo, sin embargo también se perdió un poco su coloración y quedo amarillo pálido.
Ø La primera muestra se evaporo dejando solo una pequeña mancha amarillo pálido y al agregar el agua, no se mezclo sino que solo se mojo alrededor de la marca de manteca.
Ø La reacción fue que la grasa tomo forma líquida pero no se mezclo con el agua sino que quedo suspendida en ella, después de agregar la sosa alcohólica solo cambio su coloración a un amarillo pálido casi imperceptible.
1. Se nota claramente la glicerina en el fondo del tubo y aunque no se mezclan el agua toma cuerpo aceitoso.
2. Aunque también se nota la división entre el éter y la glicerina donde se obtiene una forma como melaza.
3. Al agitar el tubo se nota como si se quisiera mezclar las sustancias, mas la glicerina queda pegada en el fondo.
4. En este tubo la separación o límites de cada sustancia son más obvias y en la glicerina esta vez queda suspendida sobre el cloroformo.
Ø Al evaporarse el éter la glicerina quedo suspendida en el papel filtro al agregar el agua, esta no se mezclo sino se mojo solamente la muestra que no tenía la muestra de glicerina.
PRUEBA PARA INSTAURACION DE LIPIDOS
TUBO 1.- ACEITE VEGETAL. El cloroformo diluyo por completo el aceite y le comió el color, después al agregar el reactivo Hubl tomo una coloración y aspecto lechoso.
TUBO 2.- MANTECA DE PUERCO. Se notan burbujas de aire dispersas en todas las sustancias al agregar el reactivo de Hubl; la muestra se torno color salmón blancuzco las aglutinaciones se hicieron imperceptibles.
TUBO 3.- MANTECA DE RES. Toma cuerpo de glicerina y algunas burbujas se aprecian en la disolución, aunque menor proporción que la manteca de puerco; después al agregar el reactivo la mezcla se torno rosa lechosa dejando una mancha grasosa por encima de la disolución.
TUBO 4.- MANTEQUILLA. Se disuelve rápido pero se notan algunas aglutinaciones por encima de la capa de la solución. Al agregar el reactivo de Hubl, la coloración cambio a un color melón y los cúmulos de grasa desaparecieron a simple vista.
